對于凋亡細胞的檢測，皺縮、變形、空泡化，抑或裂解為凋亡小體，都逃不過光學倒置顯微鏡的火眼金睛。

       吉姆薩染色、瑞氏染色等兩位“助攻”齊上陣，將凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化，核膜裂解、染色質分割成塊狀等典型形態一展無遺，以確保沒有漏網之魚。

       吉姆薩染液由天青，伊紅組成。染色原理和結果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質，與酸性染料伊紅結合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質。對細胞著色后便于觀察，方便對凋亡細胞做出檢測判斷。

       PH對細胞染色有一些影響。細胞里各種成分均不蛋白質，因為蛋白質系兩性電解質，帶電荷隨溶液PH而定，在偏酸性環境里正電荷增多，易和伊紅結合，染色為偏紅；在偏堿性環境里負電荷增多，易和美藍或天青結合，染色偏藍。

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       1.將顯影的玻片置于玻片架上，浸入盛有水的染色盤中。

       （1）1個盤：pH6.8 10 mmol/l 磷酸鈉緩沖液，所配的25倍稀釋的吉姆薩染液。

       （2）3個盤：水。

       （3）脫水系列溶液：

        ①3個盤：分別盛50%、70%和95%乙醇。

        ②2個盤：盛有100%乙醇。

        ③3個盤：盛有二甲苯。

       2.在25倍稀釋的吉姆薩染液中染玻片20 s（依染色時間決定染色的強弱），將玻片在水中浸泡3次，每次2 min。

       3.連續用乙醇脫水系列溶液處理，每盤中浸泡2 min，將玻片移至二甲苯盤中，毎次浸泡2 min，共3次。

       4.在通風櫥中，按如下操作壓片固定：用一平頭鑷（拿在左手），從二甲苯中取出一塊玻片，夾住磨面端置水平。加4滴Permount 的于另一端（切片所處位置），左手拿一干凈的蓋玻片，很緩慢地放在載玻片上（在加壓片固定介質和蓋玻片前，勿使玻片變干，因微小氣泡會造成人為假象）。

       5.用3MM 濾紙，沿蓋玻片邊緣，小心吸去多余固片介質/二甲苯，并擦拭載玻片背面（勿擦拭蓋玻片）。

       6.將玻片平放于一硬紙盒盤上，置42℃溫孵箱2天使之凝固。

       7.以剃須刀片小心刮去載玻片背面殘留膠乳，染料及固片介質。用鏡頭紙或普通棉紙擦去塵埃。放入玻片盒，必要時，載玻片上再注明標簽。

       8.顯微鏡觀察玻片，觀察時可依信號強弱，調節光亮。

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       ▲1.勿將玻片直立存放于玻片中，因此時固片介質尚未凝結。

       ▲2.細胞染色對氫離子濃度十分敏感，染色用正經片一定清潔，要無酸堿污染。

       ▲3.配制頊特液一定用優質甲醇，稀釋染色一定用緩沖液，沖洗一定用水應近中性，不然可導致各種細胞染色反應異常，以致于識別困難，甚至造成錯誤的。